PRRSV重组M蛋白表达及胶体金试纸的制备

为建立PRRSV抗体的检测方法,通过扩增PRRSV ORF6基因,将其克隆至pET-28a（＋）中,IP TG诱导重组质粒转化菌表达,经SDS-P AGE和Western blot鉴定,表明重组质粒能够表达目的蛋白;经亲和层析纯化表达蛋白,以SP A标记胶体金,用纯化M融合蛋白和羊抗猪抗体为检测线和质控线研制胶体金试纸,检测猪血清样品,比较与IDEXX ELISA试剂盒检测结果的符合率。结果表明,表达蛋白具有良好的反应性,制备的胶体金试纸与IDEXX ELISA试剂盒检测符合率为89％,该方法为P RRSV抗体的检测提供了快速简便的方法。     

植物病毒标记胶体金探针的制备

对用于植物病毒标记的几类胶体金探针的制备及其标记技术进行了研究。比较了不同情况下胶体金探针的选择、制备与保存的关键技术环节,比较了提高标记强度与特异性的方法,并且对五种植物病毒进行了标记。     

犬瘟热病毒单克隆抗体的研制及胶体金试纸条检测方法的建立

本研究利用原核表达、纯化的犬瘟热病毒(Canine distemper virus,CDV)N 蛋白免疫BALB/C小鼠,成功筛选到两株分泌CDV N 蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为D3、D6。2株杂交瘤细胞分泌单克隆抗体敏感性、特异性良好,能识别不同来源的犬瘟热病毒株,单抗亚类均为IgG1。以D3作为金标抗体,D6作为检测抗体,兔抗鼠IgG作为质控线抗体,制备犬瘟热病毒胶体金检测试纸条,检测犬瘟热病毒敏感性为1000TCID50,能有效检测区分犬瘟热病毒、犬细小病毒(Canine parvovirus,CPV)、犬腺病毒2型(Canine adenovirus type 2,CAV2)、狂犬病病毒(Rabies virus,RV)。综上,本研究建立的胶体金试纸条检测方法,灵敏度高、特异性强,适用于犬瘟热病毒临床快速诊断。     

食品中瘦肉精常用检测方法及快速检测技术的研究进展

瘦肉精能加速畜禽体内的瘦肉生长，但会对人们健康造成威胁。综述了现有瘦肉精检测方法的研究进展，主要介绍了感官检测法、酶联免疫吸附法、高效液相色谱法的优劣，重点分析了瘦肉精快速检测方法，介绍常见瘦肉精胶体金快速检测卡优化和改进措施，为后续不断深入研发新型快速检测技术提供依据，确保消费者舌尖上肉制品的安全，推动肉类食品加工行业的可持续发展。      

樱桃小果病毒1号胶体金免疫层析试纸的研发与应用

近年来，病毒病在甜樱桃主产区的发生呈上升趋势，制约了甜樱桃产业升级和发展。能够侵染甜樱桃的病毒种类中，樱桃小果病毒1号(little cherry virus 1,LChV-1)导致樱桃果实缩小，彻底丧失经济价值，对甜樱桃产量影响较大。LChV-1通常具有潜伏侵染的特性，在樱桃苗期难以通过症状进行判断。同时，多数品种对LChV-1敏感，因此该病毒的早期检测对甜樱桃的生产尤为重要。传统的病毒检测手段需要专业仪器，不能满足田间快速检测的需求。本研究获取了LChV-1外壳蛋白的多克隆抗体，并研发了一种能够准确检测LChV-1病毒的胶体金免疫层析试纸，确定了胶体金的最佳抗体标记浓度为0.24 mg/mL,检测线最佳重组蛋白浓度为0.25 mg/mL,质检线最佳羊抗兔IgG抗体浓度为0.04 mg/mL。运用该试纸检测只需10～15 min,检测时间短、成本低、结果容易判断，可用于田间快速检测。本研究为樱桃小果病的综合防控提供了有效的监测和检测手段。     

绥芬河三块鱼属鱼类和东北雅罗鱼亲缘关系的RAPD分析

利用RAPD技术对绥芬河水系三块鱼属 (Tribolodon)的金滩头、黑滩头和雅罗鱼属的东北雅罗鱼 (Leucis cuswaleckiiDybowsk)进行属间、种间遗传物质相似性分析。样品取于溯河生殖洄游期 ( 4～ 6月 )。结果表明 ,金滩头和黑滩头种间的RAPD指纹图谱带型差异显著 ,平均带纹相似系数为 0 .3 0 ,遗传距离为 0 .70。东北雅罗鱼与金滩头和黑滩头属间的平均带纹相似系数分别为 0 .13和 0 .16,遗传距离为 0 .87和 0 .84。根据绥芬河水系金滩头和黑滩头间的遗传距离 ( 0 .70 ) ,将二者划分为 2个不同物种 ,即珠星三块鱼 (TribolodonhakonensisG櫣ｎｔｈｅｒ)和三块鱼(T .brandtiDybowski)。     

胶体金免疫层析试纸条同时检测生乳中吡虫啉、吡唑醚菌酯、氟虫腈残留的研究

[目的]开发同时检测生乳中吡虫啉（Imidacloprid）、吡唑醚菌酯（Pyrazole ether ester）、氟虫腈（Fluorine worm nitrile）3 种农药残留的胶体金免疫层析的方法。[方法]采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金溶液，冻干法制备胶体金标抗体冻干粉，置于微孔杯内，复溶后，吸取全部反应液于胶体金试纸条样品垫上，经层析，在免疫层析试纸条上显示结果。[结果]吡虫啉、吡唑醚菌酯、氟虫腈3 种农药检测检测下限分别为0.1 mg/kg，0.03mg/kg，0.02 mg/kg，保质期为1 年，符合《GB2763—2021食品安全国家标准 食品中农药最大残留限量》对生乳中农药残留做出明确限量规定吡虫啉、吡唑醚菌酯、氟虫腈最大残留量0.1 mg/kg，0.03 mg/kg，0.02 mg/kg要求。[结论]该方法操作简单，快速灵敏，稳定准确，可以作为前期农残检测的快速筛查手段。